熒光偶極子的取向分布和擺動角度對細胞的結構和狀態具有重要影響,但由于寬場顯微鏡的光學切片能力差,偏振調制信號容易受到相鄰熒光團的干擾。
本文提出了一種利用偏振結構照明實現光學切片的偏振調制成像方法,并結合雙色比率成像測量極性脂質。結果顯示,該方法顯著提升了偶極子取向和擺動測量的精度。與傳統的共聚焦偏振成像相比,這種方法的成像速度提高了一個數量級,能夠捕捉到活細胞亞細胞結構的快速動態變化。
圖1 OS-PM跟蹤活細胞中脂質膜的快速動態變化。(a) 用尼羅紅標記的不同亞細胞結構的成像結果,速度為30 f.p.s。寬場(左)、寬場偏振調制(中)和光學切片偏振調制(右)。(b) (a) 中的放大圖像和延時圖像,比例尺:2μm。
雙色光學切片偏振調制(OS-PM)技術能夠快速、準確地對極性和非極性脂質膜的脂質順序進行成像,這對于研究脂質流動性至關重要。鑫圖Dhyana 400BSI相機采用背照式sCMOS芯片技術,具有高靈敏、高速和高動態成像優勢,不僅可以快速檢測微弱的熒光信號,減少光毒性和光漂白,還能快速捕捉活細胞動態變化過程,提高測量精度和成像效率。
參考文獻
Zhanghao K, Liu W, Li M, et al. Fast, Accurate Polarization and Polarity Imaging with Polarized Structured Illumination[J]. bioRxiv, 2019: 640268.
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